1.Ⅱ級生物安全柜
Ⅱ級生物安全柜又稱為層流生物安全柜。與工級生物安全柜不同之處是進入
的空氣先經(jīng)HEPA過濾,保證覆蓋臺面上的空氣是無菌的,不僅提供個人防護,也保護樣品不受污染。Ⅱ級生物安全柜共分Ⅱ級A和Ⅱ級B型2種,又可進一步再分為Ⅱ級A ?、Ⅱ級A ?Ⅱ級B ?、Ⅱ級B?型。Ⅱ級生物安全是自遏型的。流動空氣中的70%可以反復(fù)循環(huán)再利用。此種生物安全柜適合于細胞或組織培養(yǎng)、接觸2~3級危險等級病原體的操作,如果穿正壓防護服可在Ⅱ級生物安全柜上從事接觸4級危險等級感染因子的操作。
(1)Ⅱ級A型生物安全柜
Ⅱ級A型生物安全柜(圖1)有1個內(nèi)置風(fēng)機將實驗室空氣以0.38 m/s
的速率吸入安全柜,通過HEPA濾器后向下,在距工作臺表面6.18 cm處分開,一半通過前面的排風(fēng)格柵,另一半通過后面的排風(fēng)格柵。所有實驗中產(chǎn)生的氣溶膠或液滴均被向下氣流帶走。氣流經(jīng)排出通道到達安全柜頂部的2個HEPA濾器之間,此時,約70%的氣體經(jīng)供風(fēng)HEPA過濾器重新返回柜內(nèi)操作區(qū)域被再利用,其余30%的氣體經(jīng)排風(fēng)過濾器后被排到實驗室再反復(fù)利用,或通過建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)排到外界。
(2)外排風(fēng)Ⅱ級
A2型、B1型、B 2型生物安全柜外排風(fēng)Ⅱ級A2型、B1型、B 2型生物安全柜都由Ⅱ級A1型生物安全柜變化而來。這些生物安全柜各有特點(見表2),包括從開口吸人空氣的速度、工作臺面上再循環(huán)的空氣量、柜內(nèi)空氣的排出量、安全柜的排風(fēng)系統(tǒng)、壓力裝置,不同型別的生物安全柜可用于不同的實驗?zāi)康?表1)。
Ⅱ級生物安全柜A型與B型的差異在于:覆蓋工作臺表面的循環(huán)氣體和排出氣體的量不同,排出系統(tǒng)不同,詳細材料可以從制造商的說明書中獲得(圖2)。
2.Ⅲ級生物安全柜
Ⅲ級生物安全柜(圖4)整個環(huán)境是*密閉的,進入的氣體經(jīng)HEPA過濾,排
出的氣體經(jīng)2層HEPA過濾。有1個專門的系統(tǒng)保持柜內(nèi)壓力在124.5Pa,呈負壓狀態(tài),可提供的個人防護作用,用于4級危險程度病原體的操作。實驗時可容2位操作人員將手伸人手套箱內(nèi)進行操作。柜旁配備1個可以滅菌的裝有HEPA過濾排風(fēng)裝置的傳遞箱。柜底下有化學(xué)消毒劑浸泡的盒子,安全柜可與雙門的高壓滅菌器連接,接受已滅菌的物品并將用過的材料移出安全柜作滅菌處理。可以將幾個手套箱連在一起以增大工作面積。Ⅲ級生物安全柜適用于Ⅲ級或Ⅳ級生物安全水平的實驗室。
3.生物安全柜的通風(fēng)連接
Ⅱ級A1型和A2型外排式生物安全柜有“套管式"或“傘形排氣罩式"的連接。套管安裝在安全柜的排風(fēng)管上,將安全柜內(nèi)排出的氣體,引入建筑物的排氣系統(tǒng)。在套管與安全柜排風(fēng)管之間留有1個直徑差為2.5 cm的開口,以便讓實驗室內(nèi)的空氣一起抽人建筑物的排風(fēng)系統(tǒng)中。建筑物的排風(fēng)能力必須能滿足房間和柜中排風(fēng)的要求。套管必須是可拆卸的或設(shè)計成可對生物安全柜進行操作測試類型。通常,建筑物氣流的波動對套管式連接的生物安全柜的功能不會有太大的影響。
Ⅱ級B1和B2型生物安全柜通過硬管,亦即沒有任何開口地、牢固地連接到建筑物的排風(fēng)系統(tǒng),或者是連接到專門的排風(fēng)系統(tǒng)。建筑物排風(fēng)系統(tǒng)的排風(fēng)量和靜壓必須與生產(chǎn)商所的要求正好一致。對硬管道連接的生物安全柜進行認證時,要比將空氣再循環(huán)送回房間或采用套管連接的生物安全柜更費時。
4.生物安全柜的選擇
購買生物安全柜時應(yīng)考慮所提供的生物防護作用是針對操作人員個人的還是針對實驗樣品的;若是針對操作人員的防護應(yīng)明確是針對病原微生物的還是針對有毒化學(xué)物質(zhì)或兩者兼而有之。若是針對病原微生物的還應(yīng)強調(diào)微生物的生物危害級別;若是針對有毒化學(xué)物質(zhì)的可按照以下原則作選擇:工級或Ⅱ級A型生物安全柜中不進行揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)操作。Ⅱ級B1型生物安全柜只可用于少量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作,如要進行一定量的揮發(fā)性或毒性化學(xué)物質(zhì)的操作必須使用Ⅱ級B2型生物安全柜。不同型別的生物安全柜排氣特點不同